本申请公开了一种用于将承载渗余物的过滤膜(130)转移至试剂板(310)的方法,其中所述膜安装于具有肩(121)和从肩突出的裙边(122)的支撑架(120)中,所述板安装于形状与所述裙边互补的盒(300)上,所述裙边适于在盒上密封滑动直至其进入由肩形成的拱座中,该方法包括以下步骤:将所述膜支撑架的裙边密封接合在盒上,在盒和膜支撑架之间形成压差从而膜形成指向板的圆顶形,在保持压差的同时,对支架施加作用力从而使得裙边在盒上滑动直至在圆顶末端和板之间形成接触,保持对支架的作用力从而在保持压差的同时将其下移,直至其进入由肩形成的拱座中。
1.将承载渗余物的过滤膜(130)转移至试剂板(310)用于液体的微生物检测的方法,其特征在于:-将所述膜安装于具有肩(121)和从肩突出的裙边(122)的支撑架(120)中;-将用试剂浸渍的所述板安装于形状与所述裙边互补的盒(300)上,所述试剂为适于显示膜(130)的渗余物中所含微生物的溶液;-调整所述裙边以在所述盒上密封滑动直至其进入由所述肩形成的拱座中;该方法包括以下步骤:-将膜支撑架的裙边密封接合在盒上;-在所述盒和膜支撑架之间形成压差从而所述膜形成指向所述板的圆顶形式;-在保持压差的同时对支架施加作用力,从而使得裙边在盒上滑动,直至在圆顶末端和板之间形成接触;-保持支架上的作用力从而使支架下移,直至其进入由所述肩形成的拱座中,同时保持压差。
2.根据权利要求1的方法,其特征在于所述压差为施加于膜(130)和盒(300)之间的空间的压降。
3.根据前述权利要求任一项的方法,其特征在于在此之前进行用试剂浸透板(310)的步骤。
4.用于将承载渗余物的过滤膜(130)转移至试剂板(310)的工具(400),其特征在于:将所述膜安装于具有肩(121)和从肩突出的裙边(122)的支撑架(120)中;将所述板安装于形状与所述裙边互补的盒(300)上;调整所述裙边以在所述盒上密封滑动直至其进入由所述肩形成的拱座中;该膜转移工具包括:-具有自由端的工具主体(410),所述自由端适于接收所述试剂盒,-为相对于主体平移而安装的射出头(420),其适于装载到盒上以射出后者,-用于驱动射出头平移的构件(421),-用于密封和保留的构件,其配置于工具主体上从而将所述盒密封保留于工具主体上,-用于在所述盒和工具主体间施加压差的构件。
5.根据权利要求4的工具,其特征在于用于在所述盒和工具主体间施加压差的构件是在工具主体中形成的开口(413),其适于连接至工具外部的真空泵,且在其另一端向所述盒和工具主体之间的液密空间开口。
6.根据权利要求4或5的工具,其特征在于所述射出头为环形并环绕着工具的主体。
7.根据权利要求4或5的工具,其特征在于其还包括集成的压力调节构件。
8.根据权利要求7的工具,其特征在于所述压力调节构件测定皮重为40-70毫巴的压力。
9.根据权利要求4或5的工具,其特征在于配置于所述工具主体上用于密封和保留从而将所述盒密封保留于工具主体上的构件为密封件(412),密封件(412)插入为此目的而在主体中形成的槽(411)。
10.根据权利要求4或5的工具,其特征在于用于驱动射出头平移的构件为射出杠杆(421)。
11.使用根据权利要求7-10任一项的工具的方法,其特征在于其包括以下步骤:-将盒(300)置于工具(400)上从而接合用于密封和保留的为此目的而提供的构件,-用试剂浸渍板(310),-启动用于在所述盒和工具的主体间施加压差的构件,-密封接合在所述盒上的膜支撑架的裙边(122);-在所述盒和膜支撑架之间形成压差,从而膜形成指向板的圆顶形式;-在保持压差的同时,对支架施加作用力从而使得裙边在盒上滑动,直至在圆顶末端和板之间形成接触;-保持支架上的作用力从而使支架下移,直至其进入由肩形成的拱座中,同时保持压差。
12.根据权利要求11的方法,其特征在于所述盒具有能够使空气通过所述盒的开口(322),且在所述盒和膜支撑架之间使膜形成指向板的圆顶形式的压差的建立是通过经由盒在所述工具和膜之间通入空气,从而在盒和工具主体间施加压差的构件产生的。本发明主要涉及液体的微生物检测领域。更特别的,本发明涉及称为膜过滤的方法。该方法在于在多孔膜上过滤液体样品然后将膜沉积在凝胶生长培养基上。然后将该组合进行培养以使得在过滤过程中保留在膜上的样品中的微生物能够充分成长为肉眼可见的。该简单的方法使得样品中存在的微生物能够被计数,并从而确定其污染程度。过滤膜装置是已知的,其使得该方法能够实施。文献FRxa02558847描述了一种具有用于容纳样品的管状套筒(tubularxa0sleeve)的过滤装置,其中底座由过滤膜组成,其固定于形成膜支撑架并适于与含有生长培养基的容器一起操作的承口端配件(femalexa0endxa0fitting)中的套筒末端。一旦进行过滤,则将液封盖置于套筒相反的一端,其效果为压缩套筒中存在的少量空气并推动膜随后形成向外指向套筒的圆顶形。然后将套筒置于生长培养基上,膜从中心至四周与生长培养基接触,从而使得形成气泡的风险最小化。一旦膜与生长培养基接触,即可将套筒与承载膜的端口配件分离。然后对端口配件提供防护罩并随后培养该组件。在实践中,当膜从干状态转为湿状态的时候其表面积会增加。这是在过滤步骤完成后所发生的。此外,之后,其上用于沉积膜的生长培养基具有指向膜的圆顶形。从而,在培养时,通过慢慢接触生长培养基,膜会发生变形:其表面积相对于在过滤步骤完成后所得到的表面积会进一步增加。在一些微生物分析中,需要对培养后的膜施用试剂。例如,其可能是一种显示试剂。对此,要使用基本上平的板,在其上沉积膜之前用选定的试剂进行浸渍,所述膜事先与生长培养基上分离。在实践中,这会造成几个问题:-在过滤和培养之后,膜的表面积比试剂板的表面积大,-膜的曲率半径和板的曲率半径不匹配,-套筒已经不在合适的位置上,从而无法对膜施加额外的压力以使膜具有向外指向的圆顶形状,-无法移除在培养前加的盖子以避免可能由外在空气带来的污染。本发明的目的在于克服这些问题以使得试剂能够经由基本上平的板被施加至在过滤和培养后变形的膜。为此本发明提供了一种用于将承载渗余物的过滤膜转移至试剂板的方法,其中所述膜安装于具有肩和从肩突出的裙边的支撑架中;所述板安装于形状与所述裙边互补的盒上;裙边适于在所述盒上密封滑动直至其进入由肩形成的拱座中;该方法包括以下步骤:将膜支撑架的裙边密封接合在盒上,在盒和膜支撑架之间形成压差从而膜形成指向板的圆顶形;在保持压差的同时对支架施加作用力,从而使得裙边在盒上滑动直至在圆顶末端和板之间形成接触;以及在保持压差的同时保持支架上的作用力,从而将其下移直至其进入由肩形成的拱座中。从而,根据本发明的有益结果,根据该方法,膜回复至其原始的大小,其在从基本上中心的点向板外施用的时候与其支撑架的大小基本相等,从而避免了气泡的形成。事实上,即使在潮湿和承载渗余物的情况下,膜仍有一定程度的刚性。在膜相对的两侧施加压力差的事实使得其被赋予指向板的圆顶形。这使得板在下移的时候接触基本上中心的点。一旦形成该第一接触区域,即在膜和浸渍的板之间的接触区发生接触摩擦。由于膜具有一定的自身刚性,对支架施加作用力以使膜下移至板的事实会导致沿着膜和板接触区域的边界线产生对膜的放射性向心压力。换言之,一旦建立了接触区域,即可在膜被施加至板的过程中利用膜和板之间在该区域存在的摩擦来在该表面的边界线上提供向心力来将膜压向中心。这个力产生自施加给支架的力。这个力借助膜自身的刚性被传导至接触区域。压差有助于保持膜的圆顶形和刚性,以避免其自身塌陷(collapsing),即使在施加该作用力的时候。从而,根据本发明的方法使得上述问题被解决:膜被均匀地施加于板上,而限制了形成气泡的风险,并且,操作之后,膜表面积基本上回复至其原始的表面积,其基本上与板的表面积相等。根据可以组合的其他特征:-压差为施加于膜和盒之间的空间的压降。-在该方法之前进行用试剂浸透板的步骤。-该试剂为适于显示膜的渗余物中含有的微生物的溶液。根据另一个方面,本发明涉及用于将承载渗余物的过滤膜转移至试剂板上的工具,其中所述膜安装于具有肩和从肩突出的裙边的支撑架中,所述板安装于形状与所述裙边互补的盒上,裙边适于在盒上密封滑动直至其进入由肩形成的拱座中,膜转移工具包括具有适于接收所述试剂盒的自由端的工具主体,用于相对于主体进行平移的射出头,其适于装载到盒上以射出后者,用于驱动射出头平移的构件,用于密封和保留的、配置于工具主体上从而将盒密封保留于工具主体上的构件,用于在所述盒和工具主体间施加压差的构件。根据可进行组合的有益特征:-用于在盒和工具主体间施加压差的构件为形成于工具的主体中的开口,其适于被连接至工具外部的真空泵,且在其另一端向盒和工具主体之间的液密空间开口。-射出头为环形且环绕着工具的主体。从而有利于围绕着周边均匀分布地产生射出力,且盒或支架不存在变形,从而使得一旦膜与板接触,二者之间即可产生良好的附着。根据可组合的有益特征:-所述工具进一步包括用于压力调节的集成构件。-压力调节构件测定皮重(tared)为40-70毫巴之间的压力。从而,有利的,这些措施使得避免施加过高压力成为可能,从而不会使膜变形,并且保持最佳压力以在膜施加至板上的时候能够压迫膜,从而膜基本上回复至其原始大小。此外,该装置能够去除由于真空泵不规则操作而可能导致的变化。根据本发明的一个有益特征,用于密封和保留的、配置于工具主体上从而将盒密封保留于工具主体上的构件为密封件,其插入为此目的而在主体中形成的槽。该结构特别简单,且对盒进行密封和在工具上机械固位的功能是由相同的部件提供的。根据一个有益特征,用于驱动射出头平移的构件为射出杠杆。其能够增加射出力。根据另一个方面,本发明涉及一种用于实施上述工具的方法,其包括以下步骤:-将盒置于工具上从而接合用于密封和保留的构件,其是为此目的而提供的,-用试剂浸渍板,-启动用于在盒和工具主体间施加压差的构件,-将膜支撑架的裙边密封接合在盒上;-在盒和膜支撑架之间形成压差从而膜形成指向板的圆顶形式;-在保持压差的同时,对支架施加作用力从而使得裙边在盒上滑动直至在圆顶末端和板之间形成接触;-保持支架上的作用力从而使支架下移直至其进入由肩形成的拱座中,同时保持压差。根据一个有益特征,所述盒具有能够使空气通过盒的开口,且通过经由盒在工具和膜之间通入空气用于在盒和工具主体间施加压差的构件来产生盒和膜支撑架之间压差的建立,从而膜形成指向板的圆顶形式。参考下述以非限制性实施例提供的附图,通过阅读根据本发明的工具及其使用方法的实施方案可以对本发明进行更好地理解,其中:-图1-3是已知的微生物分析装置的横截面图解视图,-图4是安装于互补的盒上的膜支撑架的视图。-图5是根据本发明的具有盒和膜支撑体的工具的分解图,-图6-13是使用图5所示的装置在根据本发明的微生物分析方法中的连续步骤。更具体地参见图1和2,过滤装置100具有管状套筒110,其连接至膜130的支撑架120,其适于配合含有生长培养基210的盒200。未显示的液体样品注入套筒110,然后通过过滤膜130进行过滤。过滤完成后,承载渗余物的膜130从干状态变为湿状态,使其变松弛从而相对于原始表面积其表面积增加。这特别明显地见于图1。为了将膜130沉积于生长培养基210上,使用液封盖111封闭套筒。该盖子的封闭能够压缩套筒中少量的空气,其随后对膜施加压力,其效果是能够向外推动膜,赋予其指向套筒外部的形状,如图2所示。然后可以将套筒置于生长培养基210上而不存在生成气泡的风险。事实上,如图1和2所示,生长培养基210具有指向套筒的圆顶形状。膜130和生长培养基210之间的接触首先发生于中心,然后向外扩张,从而限制了生成气泡的风险并确保承载过滤渗余物的膜最佳附着至生长培养基。膜130和生长培养基210之间的接触建立之后,套筒110与膜130的支撑架120分离,盖111配置于支架上以保护膜130不受可能的污染。如图3所示的由含有生长培养基210的盒200、支撑膜130和盖111的支架120组成的组件随后培养一段时间,一般为6-24小时。在培养过程中,渗余物中含有的微生物生长直至其肉眼可见:其从而可以进行计数,且从而可以确定样品受污染的程度。然而,在该培养过程中,由于生长培养基是圆顶形的,膜130在其接触处逐渐发生变形。在培养完成后,由支架120和盖111组成的组件与生长培养基盒200分离,以用于盒300,使用根据本发明的转移方法在盒300上安装板310。可以注意到,在过滤和蠕变之外,膜130剧烈膨胀并且其表面积较之原始表面积大得多。如图4所示,这带来了一些问题,使得膜无法被施用于板。更确切的,膜130的几何图形与板310的几何图形非常不同,套筒110无法赋予膜圆顶形状,为了避免任何的污染而无法移除盖111。根据本发明的转移方法能够以简单、均匀和平坦的方式将膜130转移至板310上,而不会形成气泡。这可以通过使用如图5及以下所示的一系列装置来实现。根据本发明的用于将承载渗余物的过滤膜转移至板310的工具400适于接收盒300,其自身顶部具有由膜支撑架120和盖111形成的组件。更特别地参见图5,膜130安装于具有肩121和从肩突出的裙边122的支撑架120中。承载板310的盒300具有与裙边122形状互补的圆锥型外观320,以使得后者能够在盒上密封滑动直至其进入由肩形成的拱座121中。这可以更特别地参见图9-12。用于转移膜130至板310的工具400具有工具主体410,其具有适于接收盒300的自由端,并安装环形射出头420用于在主体410上的平移。射出头适合相对于工具主体移动,从而对盒外表面的下缘321施加压力以射出后者。射出头相对于主体的平移由启动杆421进行启动,其能够增加射出力。工具主体410在自由端具有槽411,其尺寸适于接收液封密封件412。一旦后者被引入工具上,那么液封密封件412和槽411即可联合形成盒300的密封和保留构件。确切的说,密封件412的弹性有助于机械保持盒300在位置上。工具400的主体410进一步具有横向开口413,其适于被端头配件414连接至未显示的外部泵装置,使得在该开口处产生压降,其在相对的一端开放于适合接收盒300的工具主体的自由端。从而,该开口使得在盒和工具主体之间能够施加压降。如图6所示,根据本发明的膜转移方法在第一个阶段在于将盒300放置于工具主体410上。该引入过程直到获得由盒300的内表面和工具400的主体410的自由端形成的拱座为止。该插入的效果为相对于主体410向下移动射出头,如图7所示。通过所述移动,启动杆421升起至基本上水平的位置。然后可以移除未显示的置于板310上的保护膜,并用试剂溶液浸透缓冲区。在本实施方案中,其是适于显示膜的渗余物中含有的微生物的溶液。更特别地参见图8,随后将膜支撑架120置于盒300上。然后启动连接至开口413的真空泵,并在盒300和密封件412之间产生吸力。如图8所示,盒在其位于板310周边的上部具有多个开口322,使得空气能够在由密封件412、盒300的下面所限定的空间和外部相互流通。如图9所示,然后将膜支撑架安装至盒300上。随着裙边122随后密封性地配合盒的圆锥形外表面320,在膜的两个面通过开口322产生了压差。然后其形成指向板的圆顶形,可参见图9。如图10所示,用垂直箭头示意的力被经由盖111施加于膜支撑架120,其效果为使得裙边122相对于盒发生滑动。然后在膜和板之间建立了基本上位于中心的接触。在保持膜相对两个面的压差的同时,压力继续施加于膜支撑架上,参见图11和12,从而将膜从中心接触区向外逐渐转移至板上。在图10-12所示的这些步骤中,膜被逐渐向其中心压迫,在该操作后其回复到原始大小。在膜相对的两侧施加压差赋予其指向板的圆顶形状。此外,膜具有一定的自身刚性。一旦在膜和板之间建立了第一接触区,施加给支架120的力和膜与板之间在该第一接触区产生的摩擦力一起会导致沿着膜和板接触区域的边界线产生对膜的放射性向心压力。膜自身的刚性和给膜提供指向板的圆顶形状的压差一起能够产生随着膜应用于板上将膜逐渐压向中心的效果,如图10-12所示。为了达到该效果,需要施加预设的压差,优选的范围为40-70毫巴。理想的,该压力为50毫巴。为了保持压力为这个值,工具的主体410设置有未显示的压力调节装置,其能够保持开口413和外部环境之间的压差恒定,从而去除由连接至端头配件414的真空泵产生的可能的压力变化。确切的说,过低的压力无法使得膜具备足够的刚性,从而在施加力的情况下会发生塌陷;相反,过高的压力会趋于使膜变形,进一步增大其表面积。施加用于支架移动的力必须足以完成从裙边122在盒300上的接合到获得由肩121和盒300的上部形成的拱座的路程,该距离在实践中为约5-6mm,且需要在大于0.6秒的时间内完成以获得该结果。一旦膜被均匀施加于板上,为了接下来的微生物分析操作—在此不进行详述—有必要抽出由支架120、盖111和工具400的盒300组成的组件。如图13所示,杠杆421出于该目的被启动。然后射出头420相对于工具主体410进行移动并均匀压迫盒300的下边缘321。这样,通过围绕着盒边缘的平坦的环形分布的力来进行抽拉,其有利于避免对其施加扭力,其效果可能是将膜从板上分离。一旦这样抽出,由盒、盖和支架形成的组件即可用于随后的微生物分析部分。一般来说,需要注意上述实施例中所有的部件具有基本上圆形的截面。然而,根据本发明形成椭圆形或多边形封闭截面的组件也在本领域技术人员的能力范围内,而不偏离本发明的范围。应当观察到,虽然上述公开的工具400被设计为用于转移例如承载渗余物的膜130的过滤膜至例如板310的试剂板上,但是该工具400、以及更广泛的根据本发明的工具还可用于转移过滤膜至不同于试剂板的部件,例如:-用不同于试剂的液体物质(例如营养液培养基)浸渍的板;或者-凝胶生长培养基,例如在培养皿中的凝胶生长培养基。还应当观察到,根据本发明的工具可用于转移膜至不平的、但是曲率不同于膜的曲率的部件,从而确保膜和部件之间的良好接触。自然,可以对上述实施方案进行多种改变而不偏离本发明的范围。